RECUENTO POR FILTACIÓN

OBJETIVO

Al finalizar, el trabajo practico , el estudiante estará en capacidad, mediante la consulta bibliográfica y la aplicación de las técnicas microbiológicas, de realizar el control microbiológico del agua de proceso, utilizando la técnica de la membrana filtrante.

FUNDAMENTO

Este método se fundamenta en determinar el numero y tipo de microorganismos presentes en una muestra de agua de proceso, por medio de la filtración de la misma a través de una membrana filtrante con poros de tamaño adecuado, la consiguiente retención de microorganismos sobre dicha membrana y el cultivo de los mismos en diferentes agares de acuerdo al tipo de micoorganismos.

MATERIALES

Muestra de agua de proceso Agua Peptonada.

Placas esteriles con medio ENDO

Placas esteriles con agar MacConkey

Membranas filtrantes esteriles

Bomba de vacio

Pinzas esteriles

Estufa

PROCEDIMIENTO

A-Colocar una menbrana filtrante esteril , bajo condiciones asépticas, sobre el centro del portafiltro, usando unas pinzas esteriles, con la superficie cuadriculada hacia arriba.

B-Ensamblar el equipo , colocando el dispositivo de filtración y asegurando con una pinza

C- verter 100ml de la muestra de agua , en el portrafiltro y proceder a filtrar.

D- Lavar el embudo con aproximadamente 100ml de agua peptonada al 0,1%

C- Remover la parte superior del portrafiltro y con una pinza esteril transferir la membrana a la placa Petri que contiene el medio de cultivo correspondiente que se va a identificar

D- Al colocar la membrana, evitar la formación de burbujas, entre esta y el medio de cultivo

E- Esperar aproximadamene 20 minutos, para permitir la adhesión de la membrana al medio

F- Con excepción de las placas de agar Sabouraud, incubar las placas en forma invertida, a las diferentes temperaturas y tiempos, de acuerdo al microorganismos investigado.

Agar ENDO incubación 35º